| | | 荧光定量PCR用于献血者筛查的意义
| | 临床医学毕业论文［摘 要］ 目的临床医学毕业论文：探讨高灵敏度荧光定量PCR用于筛查献血者HBV的临床医学毕业论文意义。方法：对400例HBsAg ELISA法阴性的献血者标本用荧光定量PCR测定HBVDNA进行对比。结果：400例标本中有5例HBVDNA阳性，占1.25%。结论：荧光定量PCR用于献血者的HBV筛查，与ELISA法相比可有效地减少漏检，显著提高血液质量，降低经输血传播HBV的可能性。
［关键词］ 献血者；荧光定量PCR；筛查
对于输血安全问题，国家制定了相应的法律法规进行管理，并对献血者进行了很严格的筛查。现在患者出现输血后感染性疾病的风险已达到了非常低的程度，但这并不意味着就没有风险，尤其是输血后HBV的感染，风险远高于HCV和HIV感染的风险，这主要是由于我国HBV人群感染率高，病毒的变异及检测方法的灵敏度等原因导致HBV的漏检而造成的。我们运用荧光定量PCR方法对400例HBsAg ELISA法阴性的献血者血清标本进行HBVDNA检测，探讨了荧光定量PCR在对献血者筛选中的意义 ，结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 标本 全部来自长沙市中心血站筛检合格的献血者，共400份，HBsAg ELISA法阴性。
1.2 试剂 荧光定量PCR试剂盒由达安基因股份公司提供。
1.3 仪器 美国PE 5700全自动荧光定量PCR仪。
1.4 方法 HBVDNA提取：血清50 μl加入DNA提取液50 μl，混匀，沸水浴10 min，然后4 ℃放置4 min~6 min。HBVDNA提取管12 000 r离心5 min，取上清液2 μl加入荧光定量PCR反应管中，将各阳性标准品、阴性对照、待测样品的PCR反应管一起置于PCR仪中检测。扩增条件：93 ℃ 2 min预变性，然后93 ℃ 30 s ，55 ℃90 s ，共计40个循环。根据纯化HBVDNA标准品建立直线回归方程，仪器软件自动分析出定量结果，拷贝数>1 000/ml判为阳性。
2 结果
400例HBsAg ELISA法阴性标本经荧光定量PCR检测有5例HBVDNA阳性，阳性率为1.25%，拷贝数分别为：2.8×104/ml， 3.71×104/ml，4.12×105/ml，4.83×104/ml，8.14×103/ml。
|
| | |
| | | | <<<<<全文未完>>>>> 全文字数约1903字 | |
| | |
| |
|
教育论文中心