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被动凝集法检测肺炎支原体抗体的实验室评价

[摘要] 目的药学大专毕业论文:探讨被动凝集法测定肺炎支原体(MP)抗体的药学大专毕业论文诊断价值。方法:分别用被动凝集法和ELISA间接法来检测50例门诊患者的MP抗体,比较两种方法是否差异有显著性。结果:被动凝集法和ELISA间接法在检测MP抗体中差异无显著性。结论:被动凝集法更能精确测定抗体滴度,敏感度高,操作简单,有重要的临床应用价值,可在临床推广使用。
  [关键词] 被动凝集法;肺炎支原体抗体;ELISA间接法
  The Evaluation of Particle Agglutination Test for Detecting Mycoplasma Pneumonia Antibody
  Abstract:Objective To investigate the application value of serodia Myco Ⅱparticle Agglutination test for MP antibody.Methods We compare the particle agglutination Test with the ELISA indirect immunofluorescence and analyzed the two methods Have significant difference or not.Results The means from the two methods indicated No significant difference(P>0.005).Conclusion The particle agglutination test can Detect MP antibody titer exactly,It is the advantage of high sensitive and operating Easily.It have the important clinical application the value and can be univer sally used In Clinic.
  Key words:The particle agglutination;MP antibody;ELISA indirect Immunofluorescence
  肺炎支原体(MP)通过呼吸道传播,冬秋季较多见,青少年易感染。引起间质性肺炎和急性支气管炎,占肺炎发病率的15%~20%,占非细菌性肺炎50%,近年来<6岁患儿发病呈上升趋势,MP体对红霉素和四环素敏感,但对常规治疗肺炎的药物耐受,为避免滥用抗生素,早期诊断尤为重要。我们分别用被动凝集法和ELISA间接法检测50例门诊患者血清中肺炎支原体抗体,并对两种方法进行分析评价。
  1 材料和方法
  1.1 试剂 被动凝集法采用日本富士瑞必欧株式会社生产的赛乐迪亚—麦克Ⅱ试剂盒,ELISA间接法采用深圳市博卡生物技术有限公司生产试剂盒。
  1.2 观察对象 2006年5月在本院就诊的50例门诊患者。
  1.3 标本采集和测定方法 采集患者末梢血100 μl,室温静置1 h,2 400 r/min离心10 min,被动凝集法吸取血清后按要求加入血清稀释液和明胶颗粒,室温静置3 h,设阴阳对照,滴度>1∶80为阳性。
  2 结果
  见表1。
  表1 两种方法检测MP体抗体的结果比较(略)
  对两种方法检测结果进行χ2检验,P>0.005两种方法差异无显著性。
  3 讨论
  MP体可从口腔呼吸道分离到,是人类原发生非典型性肺炎的主要病原体之一。病理变化主要是间质性肺炎和急性细支气管炎,还可引起肺外并发症。分离培养是确诊支原体感染的可靠方法,但需要时间较长,对临床快速诊断意义大,但患者和临床不易接受。特异性血清试验包括补体结合试验,ELISA法和间接血凝试验。补体结合试验需要一定的仪器和技术,操作较复杂,不适用于临床常规检测。ELISA间接法用于检测患者急性期和恢复期血清中特异性IgM、IgG抗体,即其敏感度与标本采集期有关,感染初期阳性率39%,疾病后期可达76%,溶血、混浊和脂血样本会干扰该试验。被动凝集法采用MP体细胞膜成分(mac株)致敏人工明胶粒子制造而成,致敏粒子与人血清中存在的MP体抗体发生凝集反应,其检测抗体滴度广,从1∶40~1∶10 240,该法用明胶颗粒作载体,从而消除了许多非特异性反应。本试验仅用于检测MP体抗体而非直接检测MP体,因而阳性结果并不能确诊是支原体感染。须注意的是,极低含量的抗体不能被检测出是可能的,因为一些患者不产生或只产生少量抗体,特别是40岁以上的人可呈阴性结果,此外大约20%成人再次感染MP后几乎检测不到MP特异性抗体。当怀疑感染时,即使试验为阴性也要隔一段时间进行重新检测。MP肺炎患者的IgM抗体感染后7 d~10 d出现,20 d左右出现IgG抗体,但检测到MP特异性抗体并不表明是急性感染,因为在MP感染后1年内,IgM可持续升高,故应结合患者临床症状加以分析和诊断。被动凝集法作为辅助诊断MP感染的试验,其方法敏感度高,简单快速,价格便宜,可作为临床常规检测项目和筛查依据。
 
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