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烟草中多酚氧化酶的生理、生化特征研究

[摘 要]对烟草叶中的烟草专卖工作论文PPO进行了部分纯化,对比了叶中PPO在苗期和田间的烟草专卖工作论文活性差异,研究了其活性变化规律,发现:生长旺盛期PPO活性高于其它时期.研究了烟叶在不同水势条件下PPO活性变化规律,发现:水势过高、过低,PPO活性均较低,在-8.7278bar水势条件下,PPO活性最高,所以,细胞中的含水量是影响PPO活性的因素之一.研究了PPO在35°C,40°C, 45°C,50°C, 55°C,60°C,65°C,70°C,75°C等烘烤温度条件下的热敏感性,发现酶的最适反应温度为35°C;温度由35°C升至75°C,活性逐渐下降,在每一温度下保持5分钟后,活性趋于稳定,并用回归法得出了烟叶中PPO的下降百分数与温度之间的关系式.用双倒数作图法比较了NaDiCa,EDTA,巯基乙醇和硫脲四种常用抑制剂对烟叶中PPO活性的抑制强度,结果表明同一浓度下它们对PPO的抑制强度依次递减,而NaDiCa抑制效率明显高于其它三种抑制剂;CuCl2可以促进PPO活性,用回归法得出了活力增加百分数与二价铜离子浓度的关系式.
  [关键词]烟叶; PPO活性变化;活性控制
  [中图分类号] S572.092 [文献标识码] A
  烟叶中的多酚氧化酶(polyhphenol oxidase )简称PPO(EC 1.10.3.1),在烟叶的生长,初烤,复烤以及卷烟工业中烟丝的卷接和包装甚至贮藏过程中都具有很重要的作用,因为它不仅会影响烟叶和烟丝的色泽,更会影响其内在质量.PPO是一种铜离子结合酶,在组织发育过程中形成,并贮存于叶绿体中,细胞膜的完整性被破坏时,酚类物质与叶绿体中的PPO结合生成σ-醌,这些高度活泼的醌与其它醌,氨基酸以及蛋白质聚合生成色素物质,降低了植物的经济价值,因此,对PPO活性进行控制以防止褐变提高经济价值的研究成为PPO研究的热点,如采用硫化物抑制剂对枇杷中PPO的活性进行抑制[1],采用谷胱甘肽和柠檬酸对荔枝中多酚氧化酶的活性进行抑制[2],不仅如此,转基因手段也被用来抑制植物中PPO的活性[3,4]. 而烟叶在烘烤过程中常常由于温湿度的不合理控制, PPO会引起烟叶过度褐变,严重影响了烟叶的外观色泽和内在质量,大大降低其工业可用性.而对烟草中PPO活性控制的研究虽然已经展开[5],但迄今仍没有一套完整和有效的办法来专一地抑制其活性,为全面掌握烟草中PPO的生理生化特性进而对其活性进行有效控制,本研究探讨了烟叶中PPO的活性在不同温度,不同水分条件和不同发育阶段的变化规律,以及一些常用抑制剂对PPO的抑制效应,旨在探讨一个有效控制PPO活性,防止烟叶褐变,提高烟叶质量的有效办法.
 
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